Ученые разработали недорогой способ диагностики одного из видов рака крови

Новый подход заключается в разработке молекулярно-генетических методов, ранее не используемых в других лабораториях для выявления редких, но разнообразных (всего их описано около 50) мутаций в 12 экзоне (так называют участок ДНК) гена JAK2. Именно эти мутации приводят к развитию ИП — онкогематологического заболевания, которое требует постоянного наблюдения со стороны врача и, как правило, сопровождается приемом циторедуктивной, антиагрегантной и даже дорогостоящей таргетной терапии.

«Мы ведём исследования в этом направлении более десяти лет и создали свой алгоритм молекулярно-генетического анализа мутаций в экзоне 12 гена JAK2. В начале, в качестве скрининг-теста для выявления данных мутаций мы впервые в России предложили и начали использовать относительно простой и дешёвый метод гетеродуплексного анализа с последующим электрофорезом в полиакриламидном геле для выявления какой-либо из 50 возможных мутаций. Если мутация выявляется, то далее проводим метод пиросеквенирования, чтобы уточнить тип мутации и уровень присутствия мутантного аллеля. Данный метод также впервые использован нашим коллективом для анализа 12 экзона гена JAK2. В нашей статье, посвящённой разработке технологии анализа соматических мутаций в 12 экзона гена JAK2 с помощью пиросеквенирования мы предположили, что этот метод является оптимальной технологией для секвенирования небольших фрагментов ДНК и идентификации различных типов мутаций (включая ранее не описанные), более чувствительным методом, чем секвенирование по Сэнгеру, и приближающимся по чувствительности к NGS.

На сегодняшний день проанализировано более 150 JAK2 (V617F)-негативных пациентов Красноярского края на наличие мутаций в экзоне 12 гена JAK2, из них выявлено 7 пациентов с мутациями. Это помогло врачам оперативно поставить правильный диагноз и назначить соответствующую терапию», — рассказала доцент кафедры медицинской биологии, заведующий научно-практической лабораторией молекулярно-генетических методов исследования СФУ Татьяна Субботина.

Существует ряд заболеваний, сопровождающихся эритроцитозом — состоянием, при котором в крови растёт число красных кровяных телец (эритроцитов), и повышается уровень гемоглобина и гематокрита. Кровь становится гуще, что ухудшает её текучесть и повышает риск образования тромбов. Существуют относительно «безопасные» мутации в генах, которые отвечают за развитие семейных форм эритроцитозов — тогда лечение не требует приёма серьёзных лекарственных препаратов. Но вот наличие мутации в гене JAK2 ассоциировано с серьёзным онкогематологическим заболеванием — истинной полицитемией (ИП).

Именно выявление соматических мутаций в гене JAK2 позволяет врачам поставить правильный диагноз и отличить это заболевание (ИП) от других состояний, сопровождающихся эритроцитозами. Анализ таких мутаций включён в клинические рекомендации и должен выполняться всем пациентам с подозрением на ИП.

«Интересно, что в 95 % случаев пациенты с диагнозом истинная полицитемия (ИП) имеют одну и ту же мутацию в 14 экзоне гене JAK2 (V617F). Для её выявления требуется лишь один анализ ПЦР. Это означает, что заказать анализ мутации JAK2 (V617F) можно в любой молекулярно-генетической лаборатории, все нуждающиеся пациенты по назначению врача могут бесплатно получить такую услугу. Но есть нюанс — около 5 % пациентов с диагнозом ИП имеют мутации не в 14, а в 12 экзоне гена JAK2. И, в отличие от "простой" мутации JAK2 (V617F), мутации в 12 экзоне очень разнообразны. Их выявление на сегодняшний день проводится лишь в некоторых крупных лабораториях Москвы и Санкт-Петербурга. А значит, необходимо максимально упростить этот анализ и сделать его доступнее, чем мы и занимаемся», — объяснила Татьяна Субботина.